植物花色苷測試盒(可見分光光度法)操作要點

植物花色苷測試盒(可見分光光度法)操作要點在完成樣品制備和標準曲線繪制后，需特別注意以下關鍵操作環節：

1. 比色皿清潔控制

使用石英比色皿前需用乙醇-鹽酸混合液（1:1）浸泡15分鐘，超純水沖洗后務鏡頭紙單向擦拭，避免纖維殘留影響透光率。每次檢測前需用待測液潤洗3次，消除界面折射誤差。

2. 波長校準技巧

開機預熱30分鐘后，先用重鉻酸鉀標準溶液進行波長準確性驗證。若595nm處吸光度偏差＞0.02，需執行儀器自校準程序。建議每批次檢測插入空白參比液進行基線校正。

3. 反應時間控制

加入提取緩沖液后立即開始計時，嚴格控制25℃±0.5℃水浴環境。對于深色樣品（如紫甘藍），應在反應第8分鐘時進行讀數，此后每間隔30秒記錄數據，取吸光度變化平穩階段的平均值。

4. 數據修正要點

當樣品OD值＞1.2時，應采用稀釋后重測而非儀器調零。建議建立基質效應校正系數：取同批次未顯色樣品提取液作為本底參照，最終結果按公式A_corrected=A_sample-A_blank×0.87（經驗系數）修正。

5. 質控管理

每10個樣品應插入標準品驗證點，回收率需控制在95%-105%。出現異常數據時，優先檢查離心轉速是否達到12000rpm并維持15分鐘，這是確保上清液澄清度的關鍵參數。

注意事項：夏季高溫環境需在冰浴條件下操作，防止花色苷降解；冬季低溫地區應將提取緩沖液預熱至30℃再使用。建議平行測定3次，剔除偏離均值15%以上的數據后取算術平均值。

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