探討elisa試劑盒的免疫沉淀技術(shù)

更新時(shí)間：2022-07-22

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　　elisa試劑盒具有特異性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，檢查速度快等多方面的特點(diǎn)。在食品藥品監(jiān)督管理局，進(jìn)行食品檢查的時(shí)候，可是有效的快速的檢測(cè)出結(jié)果，看檢測(cè)食品是否符合要求。elisa試劑盒的檢測(cè)速度比國(guó)標(biāo)法快速，且敏感性高、特異性強(qiáng)，結(jié)果分析簡(jiǎn)單。

　　elisa試劑盒能便于滲透入組織細(xì)胞內(nèi)，且未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的物理吸附現(xiàn)象。在PPA實(shí)驗(yàn)中稀釋液常用含0.5%（v/v）Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC1緩沖液。用特殊的微孔板作為測(cè)定板，elisa試劑盒用親和素包被微孔板，然后用生物維生素標(biāo)記探針的3端，再通過(guò)該生物維生素和包被在微孔板上的親和素發(fā)生連接，將探針固定在微孔板上，形成一個(gè)固相捕獲系統(tǒng)。

　　擴(kuò)增時(shí)引物用抗原標(biāo)記，這樣擴(kuò)增產(chǎn)物中就會(huì)滲入抗原。

　　PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與微孔板上的探針雜交，從而捕獲被測(cè)靶序列，由于擴(kuò)增產(chǎn)物中已經(jīng)滲入抗原，在微孔中加入HRP標(biāo)記抗體后，酶標(biāo)抗體就與靶序列的抗原免疫結(jié)合，后加入酶底物進(jìn)行酶促顯色，elisa試劑盒通過(guò)光密度測(cè)定實(shí)現(xiàn)定量。

　　PCR-ELISA比PCR本身在病毒分型，基因多態(tài)性分析與克隆鑒定等方面有其*的優(yōu)勢(shì)。另外，不應(yīng)用同位素標(biāo)記，因而避免了放射性帶來(lái)的危害，而且整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期僅需6h左右，操作簡(jiǎn)便，可用于大量標(biāo)本的檢測(cè)。盡管與熒光素染色凝膠電泳相比較，PCR-ELISA檢測(cè)結(jié)果的特異性，靈敏性和準(zhǔn)確性有顯著的提高，但是ELISA試劑盒基本上是一個(gè)開(kāi)放性的反應(yīng)系統(tǒng)，特別是在洗滌大鼠ELISA試劑盒反應(yīng)板時(shí)，很容易造成污染，從而引起假陽(yáng)性。因此，在PCR-ELISA整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，必須進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作，同時(shí)，PCR-ELISA對(duì)PCR產(chǎn)物和探針的雜交條件要求嚴(yán)格。